멀티플렉스 원스텝 RT-qPCR Premix-UNG
고양이 번호: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG Plus)는 RNA를 주형으로 하는 다중 정량 PCR 키트입니다.실험 과정에서 역전사와 정량적 PCR을 동일한 튜브에서 진행하여 실험 작업을 단순화하고 오염 위험을 줄였습니다.이 키트에서 첫 번째 가닥 cDNA는 내열성 역전사효소에 의해 효율적으로 합성되었으며 HotStart Tag DNA Polymerase에 의해 정량적으로 증폭되었습니다.키트에는 주로 최적화된 MP 버퍼, 효소 믹스 등이 포함되어 있습니다. 버퍼 용액에는 이미 Mg가 포함되어 있습니다.2+그리고 dNTP.또한, 비특이적 PCR 증폭을 효과적으로 억제하고 다중 qPCR 반응의 증폭 효율을 향상시킬 수 있는 인자들이 추가되어 증폭 효율을 확보하고 최대 다중 증폭 반응까지 수행할 수 있습니다.에어로졸 오염 위험을 효과적으로 방지하기 위해 dUTP/UDG 시스템이 추가되었습니다.
구성요소
1. 버퍼
2. 효소 믹스
사양
| 핫 스타트 | 내장된 핫 스타트 |
| 탐지 방법 | 프라이머-프로브 검출 |
| PCR 방법 | 원스텝 RT-qPCR |
| 중합효소 | Taq DNA 중합효소 |
| 샘플 유형 | DNA |
보관 조건
본 제품은 드라이아이스와 함께 배송되며 -25~-15℃에서 1년간 보관 가능합니다.자주 피해야 합니다동결-해동.별도로 저장하는 것이 좋습니다.
지침
1.반응 체계
| 구성요소 | 용량(μL) | 최종 농도 |
| 2 × MP 버퍼 | 12.5 | 1× |
| 효소 믹스 | 1 | - |
| 프라이머/프로브 혼합(2.5μM) | 3 | 0.3μM |
| 템플릿 RNA | 1-10 | - |
| RNase가 없는 H2O | 25까지 | - |
노트:
사용 전 반드시 잘 섞어주시고, 심한 진동으로 인한 과도한 거품을 피해주세요.
ㅏ.프라이머 농도: 멀티플렉스 프라이머를 포함한 프라이머 믹스. 상황에 따라 최적의 프라이머 농도는 0.l ~ 1.0μM 사이일 수 있습니다.
비.프로브 농도: 다중 프로브 라벨링 차이 형광 그룹을 포함하는 프로브 믹스, 상황에 따라 최적의 프로브 농도는 0.05~0.5μM 사이일 수 있습니다.
씨.템플릿 희석: qPCR은 매우 민감하므로 템플릿을 희석하는 것이 좋습니다.컨트롤 Ct 값은 20~35 사이가 적합합니다.
디.시스템 준비: 뉴클레아제 잔여물이 없는 매우 깨끗한 작업대, 피펫터 및 반응 튜브에서 준비하십시오.필터 요소가 있는 건 헤드를 사용하는 것이 좋습니다.교차 오염 및 에어로졸 오염을 피하십시오.
2. 최적화된 사이클링규약
| 주기 단계 | 온도 | 시간 | 사이클 |
| 역전사 | 50℃ㅏ | 20분 | 1 |
| 초기 변성 | 95℃ | 5분 | 1 |
| 증폭반응 | 95℃ | 15초 |
40-45 |
| 60℃ b | 30초 c |
노트:
ㅏ.역전사:온도는 42°C 또는 50°C를 선택할 수 있습니다.
비.증폭 반응: 설계된 프라이머의 Tm 값에 따라 온도를 조정합니다.
씨.형광 신호 획득:기기 설명서의 요구 사항에 따라 실험 절차를 설정하십시오.
노트
건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용하시기 바랍니다.
