2×Sensi Direct Premix-UNG(프로브 qPCR)

고양이 번호: HCB5151A

SensiDirect Premix-UNG(Probe qPCR)은 DNA 추출이나 시료 전처리 없이 시료에서 직접 PCR을 수행하도록 설계되었습니다.이 시약은 hot-start DNA 중합효소, 우라실 DNA 글리코실라아제(UNG), RNase Inhibitor, MgCl로 구성되어 있습니다.₂, dNTP(dTTP 대신 dUTP 포함) 및 안정제 - 정량적 PCR(qPCR)용.이 시약은 높은 억제제 내성을 갖고 있어 DNA 추출 없이 인후 면봉, 타액, 항응고 전혈, 혈장, 혈청 등의 시료 검출에 직접 적용할 수 있습니다.이 시약은 항억제성 DNA 중합효소와 UNG 효소가 혼합된 qPCR 전용 완충액을 사용합니다.따라서 억제제가 포함된 샘플에서 표적 유전자의 우수한 증폭을 얻을 수 있으며 PCR 잔류 및 에어로졸 오염으로 인한 위양성 증폭을 억제할 수 있습니다.이 시약은 Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad, Roche 등과 같은 대부분의 형광 정량 PCR 장비와 호환됩니다.

구성요소

1. 50×센시다이렉트 효소/UNG 믹스

2. 2×SensiDirect 프리믹스 버퍼(dUTP)

보관 조건

모든 구성품은 장기 보관 시 -20℃, 최대 3개월 동안 4℃에서 보관해야 합니다.해동 후 잘 섞은 후 원심분리하여 사용해주세요.빈번한 동결-해동을 피하십시오.

사이클링 프로토콜

피펫팅 지침

1. 프라이머의 최종 농도는 일반적으로 0.2μM입니다.더 나은 결과를 얻으려면 프라이머 농도를 0.2-1μM 범위 내에서 최적화할 수 있습니다.

2. 일반적으로 프로브 농도는 0.1-0.3μM 범위 내에서 최적화될 수 있습니다.프로브의 최적 농도는 실시간 PCR 증폭 장비, 프로브 유형, 형광 표지 물질의 유형과 관련이 있습니다.기기 설명서나 각 형광 프로브의 특정 요구 사항을 참조하세요.

3. 다양한 유형의 샘플에는 다양한 유형과 억제제의 함량, 표적 유전자의 복제 수가 포함되어 있습니다.샘플량은 실제 조건에 따라 고려되어야 합니다.필요한 경우 뉴클레아제가 없는 물이나 TE 완충액을 추가하여 샘플을 희석합니다.

4. 다양한 샘플의 권장량:

품질 관리

1. 기능 검출: qPCR의 민감도, 특이성 및 반복성.

2. 외인성 뉴클레아제 활성 없음: 외인성 엔도뉴클레아제 및 엑소뉴클레아제 오염이 없습니다.

제품 주의사항

1. 본 제품은 새로운 유형의 hot-start DNA 중합효소를 사용하여 1~5분 내에 활성화됩니다. 반응 완충액이 최적화되어 있어 프로브법을 이용한 이중 또는 다중 형광 정량 PCR에 더욱 적합합니다.

2. PCR 증폭의 Rn 값이 너무 낮거나 증폭이 명백히 억제되는 경우 샘플 양을 줄이거나 반응량을 늘리거나 샘플을 사전에 희석하면 결과가 향상될 수 있습니다.

3. 혈액, 타액, 소변, 인후 면봉 등의 채취는 임상 기준 요건을 준수해야 하며, 핵산 분해를 방지하기 위해 신선한 검체를 사용할 수 있습니다.

4. 서로 다른 앰플리콘은 dUTP에 대한 활용 효율과 UNG에 대한 민감도가 다르기 때문에 UNG 시스템을 사용할 때 검출 민감도가 감소하는 경우 시약을 최적화해야 합니다.필요한 경우 기술 지원을 위해 당사에 문의하십시오.

5. 1단계 반응 사이에 carryover PCR 산물이 증폭되는 것을 방지하기 위해 증폭을 위한 전용 실험 영역과 피펫이 필요합니다.장갑을 착용하고 자주 교체하고 PCR 증폭 후 반응 튜브를 열지 마십시오.