5×Neoscript Fast RT-qPCR 프리믹스 플러스-UNG

고양이 번호: HCB5142A

Neoscript Fast RT Premix-UNG(Probe qRT-PCR)은 One-Step 역전사 및 정량 PCR(qRT-PCR)에 적합한 매우 안정적인 1튜브 프로브 기반 믹스입니다.프라이머와 프로브의 사전 혼합을 지원하며 저온에서 장기간 보관 후에도 안정성을 유지합니다.추가적인 튜브 개방/피펫팅 작업 없이 사용 시 테스트할 샘플을 직접 추가할 수 있습니다.이 제품은 hot-start DNA 중합효소, M-MLV, 열에 불안정한 우라실 DNA 글리코실라아제(TS-UNG), RNase Inhibitor, MgCl 등의 구성요소를 제공합니다.₂, dNTP(dTTP 대신 dUTP 사용) 및 안정제.유전자 변형 급속 증폭 역전사 효소와 DNA 중합 효소를 사용하면 20~40분 이내에 PCR 증폭을 완료할 수 있습니다.이 시약은 항억제 증폭효소와 UNG 효소가 혼합된 효소로 구성된 qPCR용 특수 완충액을 사용합니다.따라서 표적 유전자의 좋은 증폭을 얻을 수 있으며 PCR 잔류 및 에어로졸 오염으로 인한 잘못된 증폭을 방지할 수 있습니다.이 시약은 Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad 및 Roche와 같은 제조업체의 대부분의 형광 정량 PCR 장비와 호환됩니다.

요소

1.25×Neoscript Fast RTase/UNG 믹스

2.5×Neoscript Fast RT 프리믹스 버퍼(dUTP)

보관 조건

모든 구성품은 장기 보관 시 -20℃, 최대 3개월 동안 4℃에서 보관해야 합니다.해동 후 잘 섞은 후 원심분리하여 사용해주세요.빈번한 동결-해동을 피하십시오.

qRT-PCR 반응 시스템 준비

1) a. 프라이머의 최종 농도는 일반적으로 0.2μM입니다.더 나은 결과를 얻으려면 프라이머 농도를 0.2-1μM 범위 내에서 최적화할 수 있습니다.일반적으로 프로브 농도는 0.1-0.3μM 범위 내에서 최적화될 수 있습니다.

2) b.빠른 PCR 과정을 사용하는 경우 프라이머와 프로브의 농도를 높이면 더 나은 증폭 결과를 얻을 수 있으므로 그에 따라 비율을 최적화해야 합니다.

3) 다양한 유형의 샘플에는 다양한 유형과 억제제의 함량, 표적 유전자의 복제 수가 포함되어 있습니다.샘플량은 실제 조건에 따라 고려되어야 합니다.필요한 경우 뉴클레아제가 없는 물이나 TE 완충액으로 샘플을 희석합니다.

반응 C조건

품질 관리

1.기능 감지: qPCR의 민감도, 특이성 및 반복성.

2.외인성 뉴클레아제 활성 없음: 외인성 엔도뉴클레아제 및 엑소뉴클레아제 오염이 없습니다.

노트

1.Rapid DNA Polymerase의 증폭률은 1kb/10s 이상입니다.PCR 기기마다 가열 및 냉각 속도, 온도 제어 모드 및 열전도도가 다르므로 특정 고속 PCR 기기와 결합하여 프라이머/프로브 농도 및 실행 방법을 최적화하는 것이 필수적입니다.

2.본 제품은 적용성이 넓어 고감도 분자진단에 적합한 제품입니다.Annealing 온도가 낮은 프라이머나 200bp 이상의 긴 단편을 증폭하려는 경우에는 3단계 PCR 방법을 권장합니다.

삼.서로 다른 앰플리콘은 dUTP의 활용 효율이 다르고 UNG에 대한 민감도도 다르기 때문에 UNG 시스템을 사용할 때 검출 민감도가 감소하는 경우 시약을 최적화해야 합니다.필요한 경우 기술 지원을 위해 당사에 문의하십시오.

4.Carryover PCR 산물의 증폭을 방지하기 위해 증폭을 위한 전용 실험 영역과 피펫이 필요합니다.장갑을 착용하고 자주 교체하고 증폭 후 PCR 튜브를 열지 마십시오.