Rnase 억제제(글리세롤 프리)
쥐과 RNase 억제제는 E.coli에서 발현 및 정제된 재조합 쥐과 RNase 억제제입니다.이는 비공유 결합을 통해 RNase A, B 또는 C와 1:1 비율로 결합하여 세 가지 효소의 활성을 억제하고 RNA가 분해되는 것을 방지합니다.그러나 RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H 또는 Aspergillus의 RNase에는 효과적이지 않습니다.Murine RNase 억제제는 RT-PCR, RT-qPCR 및 IVT mRNA로 테스트되었으며 다양한 상업용 역전사 효소, DNA 중합 효소 및 RNA 중합 효소와 호환되었습니다.
인간 RNase 억제제와 비교하여, 쥐 RNase 억제제에는 억제제의 비활성화를 유발하는 산화에 매우 민감한 두 개의 시스테인이 포함되어 있지 않습니다.이는 낮은 농도의 DTT(1mM 미만)에서도 안정적입니다.이 기능은 고농도의 DTT가 반응에 불리한 반응(예: 실시간 RT-PCR)에 사용하기에 적합합니다.
A응용
이 제품은 다음과 같이 RNA 분해를 피하기 위해 RNase 간섭이 가능한 모든 실험에 널리 사용될 수 있습니다.
1.첫 번째 가닥 cDNA 합성, RT-PCR, RT-qPCR 등
2. 시험관 내 전사/번역(예: 시험관 내 바이러스 복제)에서 RNA가 분해되지 않도록 보호합니다.
3.RNA 분리 및 정제 중 RNase 활성이 억제됩니다.
보관 조건
-25~-15℃에 보관하세요.
동결-해동 주기 ≤ 5회;
1년간 유효합니다.
단위 정의
1단위는 5ng의 RNase A 활성을 50% 억제하는 데 필요한 RNase 억제제의 양으로 정의됩니다.
분자 무게
RNase 억제제(글리세롤 없음)는 50kDa 단백질입니다.
품질 관리
엑소뉴클레아제 활동:
40U의 효소를 1μg의 λ-Hind III 소화 DNA와 함께 37°C에서 16시간 동안 배양한 결과, 겔 전기영동으로 측정한 결과 DNA의 분해가 검출되지 않았습니다.
엔도뉴클레아제 활성:
40U의 효소를 1μg λ DNA와 함께 37°C에서 16시간 동안 배양한 결과 겔 전기영동으로 측정한 결과 DNA의 분해가 검출되지 않았습니다.
닉킹 활동:
40U의 효소를 1μg의 pBR322와 함께 37℃에서 16시간 동안 배양한 결과 겔 전기영동으로 측정한 결과 DNA의 분해가 검출되지 않았습니다.
RNase 활동:
40U의 효소와 1.6μg MS2 RNA를 37℃에서 4시간 동안 배양한 결과, 겔 전기영동으로 측정한 결과 RNA가 분해되는 현상이 감지되지 않았습니다.
E.대장균 DNA:
TaqMan qPCR을 통해 40U의 효소가 검출됩니다.대장균 DNA는 0.1pg/40U 이하입니다.
N메모s
1.효소의 불활성화를 방지하기 위해 심하게 흔들거나 저어주지 마십시오.
2.RNase 억제제는 25℃~55℃ 범위의 온도에서 활성을 가지며 ≥65℃에서는 비활성화됩니다.
3. RNase H, RNase 1, RNase T1의 활성은 억제되지 않습니다.
4.RNase 활성을 억제하는 pH 범위는 넓으며(pH 5~9에서 활성), pH 7~8에서 최대 활성을 나타냅니다.
