바이러스 DNA/RNA 추출 키트
본 키트는 비인두 면봉(nasopharyngeal swab), 환경 면봉(environmental swab), 세포 배양 상청액, 조직 균질액 상청액 등의 시료로부터 고순도 바이러스 DNA/RNA를 신속하게 추출하는 데 적합합니다.이 키트는 고품질의 바이러스 DNA/RNA를 추출하기 위해 페놀/클로로포름 유기 용매를 사용하거나 시간이 많이 소요되는 알코올 침전을 사용할 필요가 없는 실리카 막 정제 기술을 기반으로 합니다.얻은 핵산에는 불순물이 없으며 역전사, PCR, RT-PCR, 실시간 PCR, 차세대 시퀀싱(NGS) 및 노던 블롯과 같은 다운스트림 실험에 사용할 수 있습니다.
보관 조건
15~25℃에서 보관, 상온에서 운송
구성요소
| 구성요소 | 100RXNS |
| 버퍼 VL | 50ml |
| 버퍼 RW | 120ml |
| RNase가 없는 ddH2 O | 6ml |
| FastPure RNA 컬럼 | 100 |
| 수집 튜브(2ml) | 100 |
| RNase-free 수집 튜브(1 .5ml) | 100 |
버퍼 VL:용해 및 결합을 위한 환경을 제공합니다.
버퍼 RW:잔여 단백질 및 기타 불순물을 제거합니다.
RNase가 없는 ddH2O:스핀 컬럼의 멤브레인에서 DNA/RNA를 용출합니다.
FastPure RNA 컬럼:특히 DNA/RNA를 흡착합니다.
수집 튜브 2ml:여과액을 수집합니다.
RNase-free 수집 튜브 1.5ml:DNA/RNA를 수집합니다.
응용
비인두 면봉, 환경 면봉, 세포 배양 상청액 및 조직 균질액 상청액.
스스로 준비한 교인별명
RNase가 없는 피펫 팁, 1.5ml RNase가 없는 원심분리 튜브, 원심분리기, 볼텍스 믹서 및 피펫.
실험 과정
생물 안전 캐비닛에서 다음 단계를 모두 수행합니다.
1. RNase-free 원심분리 튜브(샘플이 부족한 경우 PBS 또는 0.9% NaCl로 보충)에 시료 200μl를 넣고 Buffer VL 500μl를 첨가한 후 15~30초 동안 vortexing하여 잘 섞은 후 원심분리합니다. 잠시 동안 튜브 바닥에 있는 혼합물을 수집합니다.
2. FastPure RNA 컬럼을 2ml 수집 튜브에 넣습니다.1단계의 혼합물을 FastPure RNA 컬럼으로 옮기고 12,000rpm(13,400 × g)으로 1분간 원심분리한 후 여액을 버립니다.
3. 600μl의 Buffer RW를 FastPure RNA Columns에 첨가하고 12,000rpm(13,400 × g)에서 30초간 원심분리한 후 여액을 버립니다.
4. 3단계를 반복합니다.
5. 빈 컬럼을 12,000rpm(13,400 × g)에서 2분간 원심분리합니다.
6. FastPure RNA 컬럼을 새로운 RNase-free 수집 튜브 1.5ml(키트에 제공)로 조심스럽게 옮기고 컬럼에 닿지 않게 30 – 50μl의 RNase-free ddH2O를 멤브레인 중앙에 추가합니다.실온에 1분 동안 방치한 후 12,000rpm(13,400 × g)에서 1분 동안 원심분리합니다.
7. FastPure RNA 컬럼을 폐기합니다.DNA/RNA는 후속 분석에 직접 사용하거나 -30~-15°C에서 단기간 보관하거나 -85~-65°C에서 장기간 보관할 수 있습니다.
노트
연구용으로만 사용하세요.진단 절차에 사용하지 마십시오.
1. 미리 샘플을 실온으로 평형화합니다.
2. 바이러스는 전염성이 매우 높습니다.실험 전에 필요한 모든 안전 예방 조치를 취했는지 확인하십시오.
3. 샘플을 반복적으로 동결 및 해동하지 마십시오. 이는 추출된 바이러스 DNA/RNA의 분해 또는 수율 감소로 이어질 수 있습니다.
4. 자체 준비 장비에는 RNase-free 피펫 팁, 1.5ml RNase-free 원심분리 튜브, 원심분리기, 볼텍스 믹서 및 피펫이 포함됩니다.
5. 키트 사용 시 실험복, 일회용 라텍스 장갑, 일회용 마스크를 착용하고 RNase-free 소모품을 사용하여 RNase 오염 위험을 최소화하십시오.
6. 달리 명시하지 않는 한 모든 단계를 실온에서 수행하십시오.
메커니즘 및 작업 흐름
