울트라 뉴클레아제 GMP 등급
고양이 번호: HC2016A
UltraNuclease GMP 등급은 GMP 환경에서 유전자 조작 및 제조를 통해 대장균(E.coli)에서 발현 및 정제됩니다.과학 연구에서 세포 상층액과 세포 용해물의 점도를 낮추고, 단백질 정제 효율을 높이며, 단백질 기능 연구를 향상시킬 수 있습니다.또한 이 제품은 숙주 핵산 잔류물을 pg급으로 줄여 바이러스 정제, 백신 제조, 단백질/다당류 의약품 제조 등 응용 분야의 생물학적 제품의 성능과 안전성을 향상시킬 수 있습니다.이 밖에 세포치료제나 백신 개발 시 인간 말초혈액단핵세포(PBMC)의 응집을 방지하는 목적으로도 적용 가능하다.
UltraNuclease는 멸균된 시약 형태로 제공되며, 완충액(20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% 글리세린)에서 용출되며, 무색 투명한 액체의 모습입니다.본 제품은 GMP 공정 요건에 따라 생산되며 액상 형태로 제공됩니다.
구성요소
UltraNuclease GMP 등급(250 U/μL)
보관 조건
본 제품은 드라이아이스와 함께 배송되며 -25℃~-15°C에서 2년간 보관 가능합니다.
제품을 개봉하고 4℃에서 1주일 이상 보관한 경우에는 필터링을 권장합니다.미생물 오염을 방지하는 제품입니다.
명세서
| 표현식 호스트 | UltraNuclease 유전자를 함유한 재조합 대장균 |
| 분자 무게 | 26.5kDa |
| 전기점 | 6.85 |
| 청정 | ≥99%(SDS-PAGE) |
| 저장 버퍼 | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% 글리세린 |
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단위 정의 | 하나의 활동 단위(U)의 정의는 다음을 수행하는 데 사용되는 효소의 양입니다.2.625 mL에서 30분 동안 ΔA260의 흡수 값을 1.0만큼 변경합니다.37℃, pH 8.0의 반응 시스템(완전한 소화와 동일)37 μg 연어 정자 DNA를 올리고뉴클레오티드로 변환). |
지침
1. 샘플 수집
부착 세포: 배지를 제거하고 PBS로 세포를 세척한 후 상등액을 제거합니다.
현탁 세포: 원심분리로 세포를 수집하고 PBS로 세포를 세척한 후 6,000에서 원심분리합니다.10분 동안 rpm으로 회전시킨 후 펠릿을 수집합니다.
대장균: 원심분리로 균을 수집하고 PBS로 1회 세척한 후 8,000에서 원심분리합니다.5분 동안 rpm으로 회전시키고 펠릿을 수집합니다.
2. 시료 처리
수집된 세포 펠렛을 질량(g) 대 부피(mL)1:(10-20)의 비율로 용해 완충액으로 처리하거나 얼음이나 실온에서 기계적 또는 화학적 방법으로 처리합니다(세포 펠렛 1g에는 약
109셀).
3. 효소처리
반응 시스템에 1-5mM MgCl를 추가하고 pH를 8-9로 조정합니다.
세포 펠릿 1g을 소화할 수 있도록 UltraNuclease를 250U 비율로 첨가하고, 37℃에서 30분 이상 배양합니다."권장 반응 시간" 양식을 참조하여 선택하세요.치료 기간.
4. 상등액 수집
12,000rpm에서 30분간 원심분리하고 상청액을 수집합니다.
참고: 용액이 산성 또는 알칼리성이거나 고농도의 염분, 세제 또는변성제를 사용하는 경우 효소 투여량을 늘리거나 이에 따라 처리 시간을 연장하십시오.
권장 반응 조건온
| 매개변수 | 최적의 조건 | 효과적인 조건 |
| Mg²+농도 | 1~5mM | 1-10mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| 온도 | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT 농도 | 0~100mM | >0mM |
| 메르캅토에탄올 농도 | 0~100mM | >0mM |
| 1가 양이온 농도 | 0~20mM | 0~150mM |
| 인산염 농도 | 0~10mM | 0~100mM |
추천 반응 시간 (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease 양(최종 농도) | 반응 시간 |
| 0.25U/mL | >10시간 |
| 2.5U/mL | >4시간 |
| 25U/mL | 30 분 |
노트:
건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용해주세요!
