멀티플렉스 원스텝 RT-qPCR 프리믹스
설명
고양이 번호: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix는 RNA를 주형으로 하는 Multiplex Quantum PCR Kit입니다.실험에서는 동일한 반응관에서 역전사와 정량 PCR을 수행하여 실험 작업을 단순화하고 오염 위험을 줄였습니다.독특한 디자인의 완충액과 효소 혼합물을 원스텝 동결건조 시스템에 사용할 수 있습니다.이 키트는 정량적 증폭을 위해 hotstart Taq DNA Polymerase를 사용하여 첫 번째 가닥 cDNA를 효율적으로 합성하기 위해 내열성 역전사효소를 활용합니다.최적화된 반응 버퍼, 효소 믹스 등을 함유하고 있으며, 비특이적 PCR 증폭을 효과적으로 억제하고 다중 qPCR 반응의 증폭 효율을 높이는 인자가 추가되어 프라이머의 증폭 효율을 보장하면서 다중 형광 정량 증폭이 가능합니다.
구성요소
| 이름 |
| 1. 리오-버퍼 |
| 2. 리오효소 믹스 |
| 3. 리오 보호제 |
운송조건이온
A: Lyo 완충액 및 보호제: -25~-15℃, 유효기간은 1년입니다.
B: Lyo-효소 혼합물, 2-8℃, 유통기한은 6개월이다.
작동 지침
1. 반응 시스템(예: 25μL)
| 구성요소 | 용량(μL) | 최종 농도 |
| 리오-버퍼 | 6 | 1* |
| 리오효소 믹스 | 1 | - |
| Lyo-보호제 | 8 | - |
| 프라이머 믹스(10μM) | 1 | 0.1-1uM |
| 프로브 믹스(10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| RNA 템플릿 | 5 | - |
| DEPC H2O | 최대 25개 | - |
2. 최적화된 사이클링 프로토콜
1) 표준 사이클링 프로토콜
| 반응단계 | 온도 | 시간 | 주기 | |
| 1 | 역전사 | 50°Ca | 10 분 | 1 |
| 2 | 초기 변성 | 95°C | 5 분 | 1 |
| 3 | 증폭반응 | 95°C | 15초 | 45사이클 |
| 60°Cb | 30초c |
2) 빠른 사이클링 프로토콜
|
| 반응단계 | 온도 | 시간 | 주기 |
| 1 | 역전사 | 50°Ca | 2분 | 1 |
| 2 | 초기 변성 | 95°C | 2초 | 1 |
| 3 | 증폭반응 | 95°C | 1 초 |
45사이클 |
| 60°Cb | 13초c |
메모:
a) 뒤집다 전사: 온도는 10~15분 동안 42°C 또는 50°C 중에서 선택할 수 있습니다.
b) 증폭반응: 디자인된 프라이머의 Tm 값에 따라 온도를 조절합니다.
씨)형광 신호 인수: 요구 사항에 따라 실험 절차를 설정하십시오.악기 매뉴얼.
기술정보/사양
| 핫 스타트 | 내장된 핫 스타트 |
| 탐지 방법 | 프라이머-프로브 검출 |
| PCR 방법 | 원스텝 RT-qPCR |
| 샘플 유형 | RNA |
노트
1. 본 제품은 연구용으로만 사용됩니다.
2. 건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용해주세요!
