Rnase A
리보뉴클레아제 A(RNaseA)는 약 13.7kDa의 분자량을 갖는 4개의 이황화 결합을 포함하는 단일 가닥 폴리펩티드입니다.RNase A는 단일 가닥 RNA의 C 및 U 잔기를 특이적으로 분해하는 엔도리보뉴클레아제입니다.구체적으로, 절단은 뉴클레오티드의 5'-리보스와 인접한 피리미딘 뉴클레오티드의 3'-리보스의 인산염 그룹에 의해 형성된 포스포디에스테르 결합을 인식하여 2,3'-고리형 인산염이 해당 3으로 가수분해됩니다. '뉴클레오시드 인산염(예: pG-pG-pC-pA-pG는 RNase A에 의해 절단되어 pG-pG-pCp 및 A-PG를 생성함).RNase A는 단일 가닥 RNA를 절단하는 데 가장 활동적입니다.권장 작업 농도는 1-100μG/mL이며 다양한 반응 시스템과 호환됩니다.낮은 염 농도(0-100mM NaCl)를 사용하면 단일 가닥 RNA, 이중 가닥 RNA 및 RNA-DNA 혼성화에 의해 형성된 RNA 사슬을 절단할 수 있습니다.그러나 높은 염 농도(≥0.3M)에서는 RNase A가 단일 가닥 RNA만 특이적으로 절단합니다.
RNase A는 플라스미드 DNA 또는 게놈 DNA를 준비하는 동안 RNA를 제거하는 데 가장 일반적으로 사용됩니다. 준비 과정에서 DNase의 활성 여부는 반응에 쉽게 영향을 미칠 수 있습니다.수조에서 끓이는 전통적인 방법을 사용하여 DNase 활성을 비활성화할 수 있습니다.본 제품에는 DNase, protease가 포함되어 있지 않으며, 사용 전 열처리가 필요하지 않습니다.또한 본 제품은 RNase 보호 분석, RNA 염기서열 분석 등 분자생물학 실험에도 활용이 가능합니다.
보관 조건
제품은 -25~-15℃에서 보관할 수 있으며 유효기간은 2년입니다.
지침
이는 RNase A 저장 용액을 준비하는 일반적인 방법 중 하나입니다.에서도 준비할 수 있습니다.실험실이나 참고문헌(예:10mM Tris-HCl, pH 7.5 또는 Tris-NaCl 용액에 직접 용해)
1. 10mM 아세트산나트륨(pH 5.2)을 사용하여 10mg/mL의 RNase A 저장 용액을 준비합니다.
2. 100℃에서 15분간 가열
3. 실온으로 식힌 후 1M Tris-HCl(pH 7.4)의 1/10 부피를 추가하고 pH를 7.4로 조정합니다(예를 들어 10g/ml RNase 저장 용액 1M Tris-HCL, PH7.4 500ml를 추가합니다.
4. 냉동 보관을 위해 -20℃에서 하위 포장되어 최대 2년까지 안정적으로 보관할 수 있습니다.
[참고]: 중성 조건에서 RNaseA 용액을 끓이면 RNase 침전이 형성됩니다.낮은 pH에서 끓여서 침전이 있는 경우 관찰할 수 있는데, 이는 단백질 불순물의 존재로 인한 것일 수 있습니다.끓인 후 침전물이 발견되면 고속 원심분리(13000rpm)로 불순물을 제거한 후, 서브포장하여 냉동보관할 수 있습니다.
제품정보
| 동의어 | 리보뉴클레아제 I;췌장 리보뉴클레아제;리보뉴클레아제 3'-피리미드놀올리고핵산가수분해효소;Rnase A;엔도리보눌레스제 I |
| CAS 번호 | 9001-99-4 |
| 모습 | 백색 동결건조 분말 |
| 분자 무게 | ~ 13.7kDa (아미노산 서열) |
| Ph 값 | 7.6(활동 범위 6-10) |
| 적당한 온도 | 60℃ (활동 범위 15-70℃) |
| 활성화제 | Na2+.케이+ |
| 억제제 | Rnase 억제제 |
| 비활성화 방법 | 가열하여 비활성화할 수 없으며 원심분리 컬럼을 사용하는 것이 좋습니다. |
| 기원 | 소 |
| 용해도 | 물에 용해됨(10mg/ml) |
| 건조 손실 | 5.0% 이하 |
| 효소 활성 | ≥60 쿠니츠 단위/mg |
| 등전점 | 9.6 |
노트
여러분의 안전과 건강을 위해 실험복과 일회용 장갑을 착용하시고 수술하시기 바랍니다.
