야생 Taq DNA 중합효소

구성요소

보관상태

0°C 미만에서 운송하고 -25°C~-15°C에서 보관하세요.

단위 정의

1단위는 75°C에서 30분 동안 15nmol의 dNTP를 산불용성 물질에 결합시키는 효소의 양으로 정의됩니다.

품질 관리

1.단백질 순도 분석(SDS-PAGE):Taq DNA 폴리머라제의 순도는 SDS-PAGE 분석에 의해 결정된 95% 이상이었습니다.

2.Endonuclease 활동:최소 5U의 Taq DNA 폴리머라제와 1μg λDNA를 37℃에서 16시간 동안 측정한 결과 검출 가능한 분해가 발생하지 않았습니다.

3.엑소뉴클레아제 활성:최소 5U의 Taq DNA 폴리머라제와 1μg λ-Hind Ⅲ 소화 DNA를 37℃에서 16시간 동안 분석한 결과 검출 가능한 분해가 발생하지 않았습니다.

4.닉카제 활동:37°C에서 16시간 동안 1μg pBR322 DNA와 최소 5U의 Taq DNA 폴리머라제를 사용하면 검출 가능한 분해가 발생하지 않는 것으로 확인되었습니다.

5.RNase 활동:최소 5U의 Taq DNA 폴리머라제와 1.6μg MS2 RNA를 37°C에서 16시간 동안 분석한 결과 검출 가능한 분해가 발생하지 않았습니다.

6.대장균DNA:E. coli 16S rRNA 유전자좌에 특이적인 프라이머를 사용하여 TaqMan qPCR을 사용하여 E. coli 게놈 DNA의 존재 여부를 확인하기 위해 5U의 Taq DNA 폴리머라제를 스크리닝합니다.E. coli 게놈 DNA 오염은 1개 이하입니다.

7.PCR 증폭(5.0kb 람다 DNA)- 25주기의 PCR 증폭을 위해 5개 단위의 Taq DNA Polymerase와 5ng Lambda DNA가 포함된 50μL 반응으로 예상되는 5.0kb 생성물이 생성됩니다.

반응 설정

노트:

1) 서로 다른 템플릿의 최적 반응 농도가 다릅니다.다음 표는 50 µL 반응 시스템의 권장 템플릿 사용을 보여줍니다.

2) 특수한 용도에서 Taq DNA Polymerase의 최적 농도는 0.25 µL~1 µL 범위일 수 있습니다.

반응프로그램

노트:

1) 초기 변성 조건은 대부분의 증폭 반응에 적합하며 템플릿 구조의 복잡성에 따라 변형될 수 있습니다.템플릿 구조가 복잡한 경우 초기 변성 효과를 향상시키기 위해 사전 변성 시간을 5~10분까지 연장할 수 있습니다.

2) 어닐링 온도는 프라이머의 Tm 값에 따라 조정해야 하며 일반적으로 프라이머의 Tm 값보다 3~5℃ 낮게 설정됩니다.복잡한 템플릿의 경우 효율적인 증폭을 위해서는 어닐링 온도를 조정하고 확장 시간을 연장해야 합니다.