Rnase A
리보뉴클레아제 A(RNaseA)는 약 13.7 kDa의 분자량을 갖는 4개의 이황화 결합을 포함하는 단일 가닥 폴리펩티드입니다.RNase A는 C와 U 잔기에서 단일 가닥 RNA를 특이적으로 분해하는 엔도리보뉴클레아제입니다.구체적으로, 절단은 뉴클레오티드의 5'-리보스와 인접한 피리미딘 뉴클레오티드의 3'-리보스의 인산염 그룹에 의해 형성된 포스포디에스테르 결합을 인식하여 2,3'-환형 인산염이 해당 3'으로 가수분해됩니다. 뉴클레오시드 인산염(예: pG-pG-pC-pA-pG는 RNase A에 의해 절단되어 pG-pG-pCp 및 A-PG를 생성함).RNase A는 단일 가닥 RNA를 절단하는 데 가장 활동적입니다.권장 작업 농도는 1~100μG/mL이며 다양한 반응 시스템과 호환됩니다.낮은 염 농도(0-100mM NaCl)를 사용하면 단일 가닥 RNA, 이중 가닥 RNA 및 RNA-DNA 혼성화에 의해 형성된 RNA 사슬을 절단할 수 있습니다.
그러나 높은 염 농도(≥0.3M)에서는 RNase A가 단일 가닥 RNA만 특이적으로 절단합니다.
RNase A는 플라스미드 DNA 또는 게놈 DNA를 준비하는 동안 RNA를 제거하는 데 가장 일반적으로 사용됩니다.준비 과정에서 DNase의 활성 여부는 반응에 쉽게 영향을 미칠 수 있습니다.수조에서 끓이는 전통적인 방법을 사용하여 DNase 활성을 비활성화할 수 있습니다.본 제품에는 DNase, protease가 포함되어 있지 않으며, 사용 전 열처리가 필요하지 않습니다.또한 본 제품은 RNase 보호 분석, RNA 염기서열 분석 등 분자생물학 실험에도 사용할 수 있습니다.
보관 조건
-25℃~-15℃에서 2년 동안 보관할 수 있습니다.
명세서
| 모습 | 가루 |
| 수량 | 100mg/1g |
| 상품 유형 | RNase A |
지침
이는 RNase A 저장 용액을 준비하는 일반적인 방법 중 하나입니다.준비도 가능해요실험실이나 참고문헌(예:10mM Tris-HCl, pH 7.5 또는 Tris-NaCl 용액에 직접 용해)
1. 10mM 아세트산나트륨(pH 5.2)을 사용하여 10mg/mL의 RNase A 보관 용액을 준비합니다.
2. 100℃에서 15분간 가열한다.
3. 실온으로 식힌 후 1/10 부피의 1M Tris-HCl(pH 7.4)을 첨가하고 pH를 7.4로 조정합니다(예를 들어 10mg/mL RNase 저장 용액 1M Tris-HCl, pH7.4 500mL를 추가합니다.
4. 냉동 보관을 위해 -20℃에서 하위 포장되어 최대 2년 동안 안정적으로 보관할 수 있습니다.
[노트]:
중성 조건에서 RNaseA 용액을 끓이면 RNase 침전이 형성됩니다.낮은 pH에서 끓여서 침전이 있는 경우 관찰할 수 있는데, 이는 단백질 불순물의 존재로 인한 것일 수 있습니다.끓인 후 침전물이 발견되면 고속 원심분리(13000rpm)로 불순물을 제거한 후, 소포장하여 냉동보관할 수 있습니다.
노트
건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용하시기 바랍니다.
