DNase I (Rnase Free)(5u/ul)
고양이 번호: HC4007A
DNase I(Deoxyribonuclease I)은 단일 또는 이중 가닥 DNA를 소화할 수 있는 endodeoxyribonuclease입니다.이는 포스포디에스테르 결합을 인식하고 절단하여 5' 말단에 인산기가 있고 3' 말단에 수산기가 있는 모노데옥시뉴클레오티드 또는 단일 또는 이중 가닥 올리고데옥시뉴클레오티드를 생성합니다.DNase I의 활성은 Ca에 따라 달라집니다.2+Mn과 같은 2가 금속 이온에 의해 활성화될 수 있습니다.2+및 아연2+.5mM 칼슘2+가수분해로부터 효소를 보호합니다.Mg가 있는 경우2+, 효소는 DNA 가닥의 모든 부위를 무작위로 인식하고 절단할 수 있습니다.Mn이 있는 경우2+즉, DNA의 이중가닥이 거의 동일한 위치에서 동시에 인식되고 절단되어 편평한 말단 DNA 단편 또는 1-2개의 뉴클레오티드가 돌출된 끈적한 말단 DNA 단편을 형성할 수 있다.
구성요소
| 이름 | 0.1KU | 1KU | 5구 | 50KU |
| DNase I, RNase 없음 | 20μL | 200μL | 1mL | 10mL |
| 10×DNase I 버퍼 | 1mL | 1mL | 5×1mL | 5×10mL |
보관 조건
저장을 위한 -25℃~-15℃;얼음 팩으로 운송하십시오.
지침
1. 아래 나열된 비율에 따라 RNase-free 튜브에 반응 용액을 준비합니다.
| 요소 | 용량 |
| RNA | X µg |
| 10 × DNase I 버퍼 | 1μL |
| DNase I, RNase 없음(5U/μL) | µg RNA당 1U① |
| ddH2O | 최대 10μL |
참고: ①RNA 양을 기준으로 첨가해야 하는 DNase I의 양을 계산합니다.
2. 37℃에서 15분간;
3. 0.5M EDTA를 최종농도 2.5mM~5mM이 되도록 첨가하고 65℃에서 10분간 가열하여 반응을 정지시킨다.시료는 역전사 등 다음 반응에 직접 사용될 수 있습니다.실험.
단위 정의
1 단위는 1μg의 pBR322를 완전히 분해하는 효소의 양으로 정의됩니다.37℃에서 10분만에 DNA.
품질 관리
RNase:5U의 DNase I과 1.6μg MS2 RNA를 37℃에서 4시간 동안 분해하면 다음과 같이 분해되지 않습니다.아가로스 겔 전기영동에 의해 결정된다.
노트
1. 0.5MEDTA를 직접 준비해주세요.
2. RNA 1μg당 1U DNase I을 사용하십시오.단, RNA가 1μg 미만인 경우에는 1U DNase I을 사용하시기 바랍니다.
3. 작동 중에는 효소를 얼음 위에 올려 놓아주세요.
