2×HiF Taq + 마스터 믹스
고양이 번호: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix(염료 포함)는 Plus HIF DNA 중합효소, dNTP 및 최적화된 완충액을 포함하는 즉시 사용 가능한 2x 사전 혼합 솔루션입니다.중합효소 활성과 3'→5'엑소뉴클레아제 활성을 억제하는 실온에서 2개의 단클론 항체를 마스터 믹스에 추가하여 쉽고 매우 특이적인 Hot Start PCR을 수행합니다.연장 인자는 효소에 긴 단편 증폭 능력을 제공하기 위해 마스터 믹스에 추가됩니다. 증폭 길이는 최대 13kb일 수 있으며, 효소는 5'→3' DNA 중합효소 활성과 3'→5'를 갖습니다. 엑소뉴클레아제 활성도는 Taq DNA 중합효소의 83배, 일반 DNA 중합효소의 9배입니다.복잡한 템플릿의 증폭에 적합하며 증폭 제품은 무딘 끝입니다.
2×HIF Taq plus Master Mix(염료 포함)는 빠르고 쉬우며, 높은 민감도, 강한 특이성, 우수한 안정성 등의 장점을 갖고 있으며, 반응 시스템은 프라이머와 템플릿만 추가하면 되며 2개로 증폭할 수 있습니다. 단계 프로토콜을 사용하여 실험 단계를 단순화하고 시간을 절약합니다.본 제품에는 전기영동 지시염료가 포함되어 있으며, PCR 제품을 직접 전기영동에 사용할 수 있습니다.또한, 제품에는 특정 보호제가 포함되어 있어 마스터 믹스가 반복된 동결-해동 후에도 안정적인 활성을 유지할 수 있습니다.
보관 조건
제품은 -25~-15℃에서 1년간 보관해야 합니다.
명세서
| 제품 사양 | 마스터 믹스 |
| 집중 | 2× |
| 핫 스타트 | 내장 핫 스타트 |
| 위에 걸리다 | 무딘 |
| 반응 속도 | 빠른 |
| 크기(최종제품) | 최대 13kb |
| 운송 조건 | 드라이 아이스 |
| 상품 유형 | 충실도가 높은 PCR 프리믹스 |
지침
1.PCR 반응 시스템
| 구성요소 | 용량(μL) |
| DNA 템플릿 | 적합한 |
| 정방향 프라이머(10μmol/L) | 2.5 |
| 리버스 프라이머(10μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq + 마스터 믹스 | 25 |
| ddH2O | 50까지 |
2.다양한 템플릿의 권장 사용
| 템플릿 유형 | 1kb에서 10kb까지 조각 증폭 |
| 게놈 DNA | 50ng-200ng |
| 플라스미드 또는 바이러스 DNA | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2.5 µL (최종 PCR 반응량의 10%를 초과하지 마십시오) |
삼.증폭 프로토콜
1) 2단계 프로토콜(복잡성 템플릿)
| 사이클 단계 | 온도 | 시간 | 사이클 |
| 초기 변성 | 98℃ | 3분 | 1 |
| 변성 | 98℃ | 10초 | 30-35 |
| 확대 | 68℃ | 30초/kb | |
| 최종 연장 | 72℃ | 5 분 | 1 |
2) 3단계 프로토콜(일반 프로토콜)
| 사이클 단계 | 온도 | 시간 | 사이클 |
| 초기 변성 | 98℃ | 3분 | 1 |
| 변성 | 98℃ | 10초 | 30-35 |
| 가열 냉각 | 60℃ | 20초 | |
| 확대 | 72℃ | 30초/kb | |
| 최종 연장 | 72℃ | 5 분 | 1 |
3) 어닐링 그라데이션 프로토콜(복잡성 템플릿)
| 사이클 단계 | 온도 | 시간 | 사이클 |
| 초기 변성 | 98℃ | 3분 | 1 |
| 변성 | 98℃ | 10초 | 15 (1주기당 1℃감소) |
| 경사 어닐링 | 70-55℃ | 20초 | |
| 확대 | 72℃ | 30초/kb | |
| 변성 | 98℃ | 10초 |
20 |
| 가열 냉각 | 55℃ | 20초 | |
| 확대 | 72℃ | 30초/kb | |
| 최종 연장 | 72℃ | 5 분 | 1 |
다양한 증폭 프로토콜의 기능
| 프로토코l | 두 걸음 | 3단계 | 경사 어닐링 |
| 투기. | 빠른 | 중간 | 느린 |
| 특성 | 높은 | 중간 | 높은 |
| PCR 수율 | 중간 | 높은 | 중간 |
| 탐지율 | 높은 | 중간 | 높은 |
노트
건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용해주세요!
