UDG/UNG 효소
UDG(우라실 DNA 글리코실라제)는 ssDNA 및 dsDNA에서 우라실 염기와 당-인산 백본 사이의 N-글리코시드 연결의 가수분해를 촉매할 수 있습니다.에어로졸 오염을 쉽게 제어할 수 있으며 PCR, qPCR, RT-qPCR 및 LAMP와 같은 일반적인 분자 생물학 시스템에 적합합니다.
명세서
| 표현식 호스트 | 우라실 DNA 글리코실라제 유전자를 갖는 재조합 대장균 |
| 분자 무게 | 24. 8kDa |
| 청정 | ≥95%(SDS-PAGE) |
| 열 불활성화 | 95℃, 5~10분 |
| 단위 정의 | 1 단위(U)는 25℃에서 30분 동안 1 μg dU 함유 dsDNA의 가수분해를 촉매하는 데 필요한 효소의 양으로 정의됩니다. |
저장
제품은 -25℃~-15°C에서 2년간 보관해야 합니다.
지침
1.다음 시스템에 따라 PCR 반응 혼합물의 제조
| 구성요소 | 용량(μL) | 최종 농도 |
| 10×PCR 버퍼(Mg²+Plus) | 5 | 1× |
| 25mmol/LMgCl | 3 | 1.5mmol/L |
| dUTP(10mmol/L) | 3 | 0.6mmol/L |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/침출) | 1 | 0.2mmol/침출 |
| 템플릿 DNA | X | - |
| 프라이머1(10μmol/L) | 2 | 0.4μmol/L |
| 프라이머 2(10μmol/L) | 2 | 0.4μmol/L |
| Taq DNA 중합효소(5U/μL) | 0. 5 | 0.05U/μL |
| 우라실 DNA 글리코실라제(UDG/UNG), 1U/μL | 1 | 1U/μL |
| ddH2O | 최대 50개 | - |
메모: 실험 요구 사항에 따라 dUTP의 최종 농도는 0.2-0.6mmol/L 사이에서 조정될 수 있으며, 0.2mmol/L dTTP를 선택적으로 추가할 수 있습니다.
2.증폭 절차
| 사이클 단계 | 온도 | 시간 | 사이클 |
| dU 함유 템플릿 저하 | 25℃ | 10분 | 1 |
| UDG 활성화, 템플릿 초기 변성 | 95℃ | 5~10분 | 1 |
| 변성 | 95℃ | 10초 |
30-35 |
| 가열 냉각 | 60℃ | 20초 | |
| 확대 | 72℃ | 30초/kb | |
| 최종 연장 | 72℃ | 5 분 | 1 |
메모: 25°C에서의 반응 시간은 실험 요구 사항에 따라 5~10분 내에서 조정될 수 있습니다.
노트
1.UDG는 대부분의 PCR 반응 완충액에서 활성화됩니다.
2.효소는 사용 시 아이스박스나 얼음조에 보관해야 하며, 사용 후 즉시 -20°C에서 보관해야 합니다.
3.건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용해주세요!
