멀티플렉스 qPCR 프로브 프리믹스
고양이 번호: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based)는 높은 민감도와 특이도를 특징으로 하는 2×real-time 정량 PCR 증폭을 위한 pre-solution이며, 색상은 파란색이며, 시료 추가 효과가 있습니다.본 제품은 단일 반응웰에서 최대 4개의 형광 정량 PCR 반응이 가능한 2× Mix pre-mixed 시약입니다.본 제품에는 Taq 효소를 hot-start하는 유전자 변형 항체법이 포함되어 있어 증폭 민감도와 특이도가 크게 향상되었습니다.동시에 이 제품은 다중 반응 완충액을 심층적으로 최적화하여 반응의 증폭 효율을 향상시키고 저농도 템플릿의 효과적인 증폭을 촉진할 수 있습니다.본 제품은 genotyping 및 다중 정량 분석에 사용할 수 있습니다.
사양
| 핫 스타트 | 내장된 핫 스타트 |
| 탐지 방법 | 프라이머-프로브 검출 |
| PCR 방법 | qPCR |
| 중합효소 | Taq DNA 중합효소 |
| 샘플 유형 | DNA |
보관 조건
본 제품은 드라이아이스와 함께 배송되며 -25~-15℃에서 2년간 보관 가능합니다.
지침
1. 반응체계
| 구성요소 | 용량(μL) | 최종 농도 |
| 2× TaqMan 멀티플렉스 qPCR 마스터 믹스 | 12.5 | 1× |
| 프라이머 믹스(10μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5μmol/L |
| 프로브 믹스(10μmol/L)b | × | 50~250nmol/L |
| Rox 참조 염료 | 0.5 | 1× |
| 주형 DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | 최대 25 | - |
노트:세게 흔들어서 거품이 너무 많이 나지 않도록 사용하기 전에 잘 섞으세요.
ㅏ.프라이머 농도: 프라이머 믹스에는 여러 쌍의 프라이머가 포함되어 있습니다. 일반적으로 각 프라이머의 최종 농도는 0.2μmol/L이며 적절하게 0.1~0.5μmol/L 사이에서 조정할 수도 있습니다.
비.프로브 농도: 프로브 믹스에는 서로 다른 형광 신호를 갖는 여러 프로브가 포함되어 있으며 각 프로브의 농도는 특정 상황에 따라 50~250nmol/L 사이에서 조정될 수 있습니다.
1.Rox 염료 참조: Applied Biosystems와 같은 Real Time PCR 증폭 장비에서 웰 사이에 생성된 형광 신호의 오류를 수정하는 데 사용됩니다.이 제품에는 Rox 염료 참조가 포함되어 있지 않습니다.필요한 경우 Cas#10200을 권장합니다.
2.템플릿 희석: qPCR은 매우 민감하므로 템플릿을 희석하여 사용하는 것이 좋습니다.템플릿이 cDNA 스톡 솔루션인 경우 템플릿 볼륨은 전체 볼륨의 1/10을 초과해서는 안 됩니다.
삼.반응 시스템: 표적 유전자 증폭의 효율성과 반복성을 보장하려면 25μL, 30μL 또는 50μL이 권장됩니다.
4.시스템 준비: 매우 깨끗한 벤치에서 준비하고 뉴클레아제 잔류물이 없는 팁과 반응 튜브를 사용하십시오.필터 카트리지와 함께 팁을 사용하는 것이 좋습니다.교차 오염 및 에어로졸 오염을 피하십시오.
2.반응 프로그램
| 사이클 단계 | 온도. | 시간 | 사이클 |
| 초기 변성 | 95℃ | 5분 | 1 |
| 변성 | 95℃ | 15초 | 45 |
| 어닐링/연장 | 60℃ | 30초 |
노트:
1.Annealing/Extension: 설계된 프라이머 Tm 값에 따라 온도와 시간을 적절하게 조정할 수 있습니다.
2.형광 신호 획득: 다양한 qPCR 검출 장비에 필요한 형광 신호 획득 시간은 다릅니다. 최소 시간 제한에 따라 설정하십시오.몇 가지 일반적인 기기의 시간은 다음과 같이 설정됩니다.
20초: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31초: Applied Biosystems 7300
32초: Applied Biosystems 7500
노트
건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용해주세요!
