RT-LAMP 측색 마스터 믹스 HCB5204A
본 제품에는 반응 완충액, RT-Enzymes Mix(Bst DNA 중합효소 및 내열성 역전사효소), 동결건조된 보호제 및 발색 염료 성분이 포함되어 있습니다.사용하려면 Buffer만 사용하면 되고, 반응효소와 프라이머를 혼합하여 template에 첨가하면 됩니다.동결건조된 보호제를 추가하는 것은 간단할 수 있습니다.동결건조기에 연결하여 동결건조하였으며, 사용시에는 프라이머와 템플릿만 첨가하여 사용하였습니다.이 키트는 증폭을 빠르고 명확하게 시각적으로 감지하며, 음성 반응은 빨간색으로 표시되고 양성 반응은 노란색으로 변경됩니다.
요소
| 요소 | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| 루프 매개 증폭 완충액(염료 포함) | 0.96mL | 4.80mL×2 | 9.60mL×10 |
| RT-효소 믹스 | 270μL | 2.70mL | 2.70mL×10 |
| 동결건조된 보호제 | 0.96mL×2 | 9.60mL×2 | 9.60mL×20 |
응용
DNA 또는 RNA 등온 증폭용.
보관 조건
드라이아이스와 함께 운송되며, -25~ -15℃에 보관됩니다.잦은 동결/해동을 피하세요. 제품의 유효기간은 12개월입니다.
규약
1.실온에서 사용할 반응 완충액을 해동합니다.튜브를 짧게 소용돌이치거나 여러 번 뒤집어 완전히 혼합한 다음 원심분리하여 액체를 튜브 바닥에 모읍니다.
2.반응 시스템의 준비.이 시약은 액체 반응 혼합물과 동결건조 시스템 혼합물의 두 가지 반응 시스템으로 제조될 수 있습니다.
1) 액상 반응 혼합물을 준비한다
| 요소 | 용량 |
| 루프 매개 증폭 완충액(염료 포함) | 10μL |
| RT-효소 믹스 | 2.8μL |
| 10 × 프라이머 믹스a | 5μL |
| 템플릿 DNA/RNA b | × μL |
| 뉴클레아제가 없는 물 | 최대 50μL |
2) 동결건조 시스템 믹스
① 동결건조된 혼합물을 준비한다
| 요소 | 용량 |
| 루프 매개 증폭 완충액(염료 포함) | 10μL |
| 동결건조된 보호제 | 20μL |
| RT-효소 믹스 | 2.8μL |
| 뉴클레아제가 없는 물 | 최대 50μL |
② 동결건조 : 제조된 Mix를 50μL system에서 동결건조하였다.
③ 반응혼합물 준비
| 요소 | 용량 |
| 동결건조된 혼합물 | 1 조각 |
| 10 × 프라이머 믹스a | 5μL |
| 템플릿 DNA/RNA b | × μL |
| 뉴클레아제가 없는 물 | 최대 50μL |
노트:
1) 가.10×프라이머 믹스: 16μM FIP/BIP, 2μM F3/B3, 4μM 루프 F/B;
2) ㄴ.핵산 온도에는 DEPC(수용성)를 권장합니다.
1.65°C에서 30~45분 동안 배양합니다. 색상 변화에 따라 반응 시간을 적절히 연장할 수 있습니다.
2.육안으로 보면 노란색은 양성, 빨간색은 음성이었습니다.
노트
1.소금이 버퍼 튜브 바닥에 나타날 수 있으며, 짧게 소용돌이치거나 튜브를 여러 번 뒤집어 실온에서 완전히 섞일 수 있습니다.
2.반응온도는 프라이머의 상태에 따라 62℃에서 68℃ 사이에서 최적화될 수 있습니다.
3.포장된 시약은 오랫동안 공기에 노출되어서는 안됩니다.
4.빨간색과 노란색으로 변색되는 반응은 반응 시스템의 pH 변화에 따라 달라집니다. Tris 핵산 저장 용액이 포함된 제품은 사용하지 마십시오. ddH를 사용하는 것이 좋습니다.2O 저장된 핵산;
5.반응 시스템 준비, 동결건조, 시료 처리 및 시료 추가 과정을 포함하여 실험이 표준화되어야 합니다.
6.오염을 방지하려면 매우 깨끗한 벤치에서 반응 시스템을 준비하는 것이 좋습니다. 다른 경우에는 잘못된 양성 간섭을 방지하기 위해 실내의 흄 후드에 템플릿을 추가하는 것이 좋습니다.
