One Step Fast RT-qPCR 프로브 Premix-UNG
고양이 번호: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit(FOR FAST)는 RNA(예: RNA 바이러스)를 주형으로 사용하는 Single-plex 또는 Multiplex 정량 PCR에 적합한 프로브 기반 RT-qPCR 고속 검출 키트입니다.본 제품은 차세대 항체 변형 Taq DNA Polymerase와 One-Step 전용 Reverse Transcriptase를 사용하여 신속한 증폭에 최적화된 완충액을 사용하여 증폭 속도가 빠르고 증폭 효율과 특이도가 높은 제품입니다.단시간에 저농도 및 고농도 시료의 Single-plex와 Multiplex 모두에서 균형 잡힌 증폭을 지원합니다.
구성요소
1. 5×RT-qPCR 버퍼(U+)
2. 효소믹스(U+)
노트:
ㅏ.5×RT-qPCR 완충액(U+)에는 dNTP 및 Mg가 포함됩니다.2+;
비.효소 혼합물(U+)에는 역전사효소, Hot Start Taq DNA 중합효소, RNase 억제제 및 UDG가 포함됩니다.
씨.RNase-Free 팁, EP 튜브 등을 사용하십시오.
사용 전, 5×RT-qPCR 버퍼(U+)를 잘 섞어주세요.해동 후 침전물이 있는 경우 완충액이 상온으로 돌아올 때까지 기다려 혼합 및 용해시킨 후 정상적으로 사용하십시오.
보관 조건
본 제품은 드라이아이스와 함께 배송되며 -25~-15℃에서 1년간 보관 가능합니다.
지침
1. 반응 체계
| 구성요소 | 용량(20μL 반응) |
| 2 ×RT-qPCR 버퍼 | 4μL |
| 효소믹스(U+) | 0.8μL |
| 프라이머 포워드 | 0.1~ 1.0μM |
| 프라이머 리버스 | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan 프로브 | 0.05~0.25μM |
| 주형 | XμL |
| RNase가 없는 물 | 최대 25μL |
참고: 반응량은 10-50μL입니다.
2. 사이클링 프로토콜(S표준)
| 주기 단계 | 온도 | 시간 | 사이클 |
| 역전사 | 55℃ | 10 분 | 1 |
| 초기 변성 | 95℃ | 30초 | 1 |
| 변성 | 95℃ | 10초 | 45 |
| 어닐링/연장 | 60℃ | 30초 |
| 사이클링 프로토콜 (빠른) 주기 단계 |
온도 |
시간 |
사이클 |
| 역전사 | 55℃ | 5 분 | 1 |
| 초기 변성 | 95℃ | 5초 | 1 |
| 변성 | 95℃ | 3초 | 43 |
| 어닐링/연장 | 60℃ | 10초 |
노트:
ㅏ.역전사 온도는 50℃에서 60℃ 사이이며 온도를 높이면 복잡한 구조와 높은 CG 함량 템플릿을 증폭하는 데 도움이 됩니다.
비.최적의 어닐링 온도는 프라이머의 Tm 값을 기준으로 조정해야 하며, Real Time PCR 기기를 기준으로 형광 신호 수집에 가장 짧은 시간을 선택해야 합니다.
노트
건강과 안전을 위해 실험복, 장갑 등 필수 PPE를 착용해주세요!
